盐酸芬氟拉明(fenfluramine hydrochloride,简称FH)为苯丙胺类食欲抑制药 。其原料药和片剂均为中国药典1995年版二部新增品种，含量测定方法分别为非水碱量法和 气相色谱法［1］，文献报道还有酸性染料比色法［2］和阴离子表面活性剂滴定法［ 3］。作者在用气相色谱法［1］测定不同厂家生产的FH片含量时发现，不同的处方 其辅料对片剂的含量测定有影响。为了进一步考察其影响的程度，我们建立了以十八烷基硅 胶键合相的色谱柱为分析柱，以改性的甲醇-水为流动相的高效液相色谱法测定FH片的含量 ，并与气相色谱法［1］测定的值作比较，现将结果报道如下：
1　仪器与试药
1.1　仪器　美国Waters高效液相色谱仪，510输液泵，484可变波长紫外 检测器，745B色谱数据处理机，TCM色谱柱温控制仪，7725i进样阀(定量管20 μL)；日本岛 津GC-14B气相色谱仪；浙江大学N-2000型色谱工作站；梅理特AE-240电子天平(十万分之一) ；CQ-250超声波清洗器。
1.2　试药　FH对照品(中国药品生物制品检定所，批号0073-9501)；FH 片：规格为每片20 mg，薄膜衣片，分别由A、B、C、D4家药厂提供或市售品；内标物：正十 四烷(美国Sigma公司)；甲醇(色谱纯，上海吴泾化工厂)，磷酸、三乙胺和氯仿均为分析纯 ；水为蒸馏水。
2　高效液相色谱法
2.1　色谱条件与系统适用性试验　色谱柱：Alltima C18柱(5 μm，4.6 mm×150 mm)；流动相：0.05 mol.L-1磷酸液(用三乙胺调pH 2.5)-甲醇(50∶50)；流速1.0 mL.min-1; 检测波长：254 nm；进样量：20 μL；纸速0.25 cm.min-1；ATT=256；柱温：30 ℃。在此色谱条件下，得色谱图见图1。FH的峰形对称，理论板数大于2 500。
图1　高效液相色谱图
A.对照品　B.样品
1.盐酸芬氟拉明
2.2　线性关系　精密称取经105 ℃干燥至恒重的FH对照品50. 25 mg，置25 mL量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液；精密量取此液1.0， 2.0，3.0，4.0，5.0 mL，分置10 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。在本文给定的色 谱条件下进行测定，记录色谱图，以FH浓度C( mg.mL-1)和相应的基线构成之面积称峰面积。A＝×σ×h＝2.507σh＝1.064 Wh/2h>峰面积A( ×10-6)绘制标准曲线，结果表明当FH浓度在0.20～1.0 mg.mL-1范围内 与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：
C=-0.023 4+0.314A　r=0.999 9
2.3　精密度考察　取样品含量测定项下的同一份溶液，连续进样6次， 求得FH峰面积的RSD=0.2%；另取同一份样品的2份溶液，于日内不同时间分别进样测定 ，求得日内含量的RSD=0.9%(n=4)；于日间连续测定3 d，求得日间含量的RSD =0.7%(n=6)。
2.4　重现性试验　按含量测定项下的方法，取同一批样品5份进行测定 ，求得含量的RSD=0.6%(n=5)。
2.5　回收率试验　按处方配比，称取一定量空白辅料，置100 mL量瓶中 ，精密加入FH对照品溶液适量，浓度按±20%范围变动，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，照 “样品含量测定”项下方法操作，求得平均回收率为99.4%，RSD=1.0%，n=5。
2.6　最低检测浓度　按信噪比(S/N)=2时，最低可检测浓度为2.5 μg.mL-1，最小检出量50 ng。
2.7　样品含量测定　取不同厂家生产的样品8批，每批各20片，除去薄 膜衣，精密称重，研细，精密称取适量(约相当于FH 60 mg)，置100 mL量瓶中，加水溶解并 稀释至刻度，摇匀，滤过，按本文给定的色谱条件测定；另取0.60 mg.mL-1的FH对 照品溶液，同法测定，按外标法的峰面积计算。色谱图见图1，结果见表1。
表1　样品含量测定结果(标示量%，n=5)
厂名 批号 高效液相色谱法 气相色谱法［1］
A厂 990502
104.2(0.5)
95.2(1.7)
　 990503 104.6(1.0) 94.8(1.5)
　 990504 103.4(0.4) 95.0(0.5)
　 990505 106.6(0.6) 98.5(1.0)
　 990506 107.1(0.6) 97.5(1.1)
B厂 980703 98.6(0.2) 99.4(0.7)
C厂 930401 97.7(1.5) 96.6(0.3)
D厂 980503 102.5(1.2) 90.8(0.8)
注：括号内为RSD(%)值
3　气相色谱法［1］
3.1　色谱条件与系统适用性试验　色谱柱：玻璃柱2 m ×3 mm；填充剂：10%PEG-20M和2%氢氧化钾/硅烷化102白色担体40～60目；柱温为145 ℃； 进样温度为200 ℃，检测器温度为220 ℃；检测器：FID；气体流速：氮气60 mL.m in-1，氢气50 kPa，空气50 kPa；量程：102；衰减：5；纸速：3.2 mm.min -1；进样量：0.6 μL。色谱图见图2。理论板数与分离度均符合规定。
图2　气相色谱图
A.对照品　B.样品
1.正十四烷(内标)　2.盐酸芬氟拉明
3.2　校正因子测定　精密称取经105 ℃干燥至恒重的FH对照品约50 mg(2份)，置10 mL量瓶中，精密加入0.4%正十四烷氯仿液5.0 mL，溶解，在上述给定的 色谱条 件下取样测定，记录色谱图，用峰面积计算校正因子，求得7次的平均校正因子为1.330 8 ，RSD=0.