| 分光光度计测定总胆碱的方法 |
| 整理时间:2008-7-7 9:58:00 查看次数:1339 关键词:分光光度计,总胆碱 来源:
|
| 胆碱是一种强有机碱,存在于磷脂中,又是乙酰胆碱的前体,同时具有维生素的特性。胆碱在化学上为(β-羟乙基)三甲基胺的氢氧化物,其分子式为HOCH2CH2N+(CH3)3。胆碱呈无色味苦的白色浆液,易溶于水,具有很强的吸湿性。胆碱易与酸反应生成更稳定的结晶盐(如氯化胆碱),在强碱条件下也不稳定,但对加热和贮存稳定。
胆碱广泛存在于各类食物中,尤其是动物性食物。食物中胆碱的测定方法主要有酶法、比色法。酶法的原理是将胆碱在胆碱氧化酶的作用下产生过氧化氢,后者在过氧化物酶的作用下使发色剂显色,在一定波长下测定显色的吸光度值,与胆碱浓度呈正比。此法敏感、特异性高,但是胆碱氧化酶价格比较贵,国内较难买到。本书中介绍比色法测定食物中胆碱含量,包括结合型和游离型胆碱,最小检出限为0.15mg。
|
1. 原理食物中的胆碱经过处理提取后,通过Florisil柱色谱纯化,然后用雷纳克盐(Reineckate)与胆碱反应形成粉红色的胆碱-雷纳克盐复合物,这种复合物被丙酮洗脱后,在526nm有最大吸收,其吸收值与胆碱浓度成正比。
2. 适用范围参照Methods of Vitamin Assay,适用于各类食物中胆碱的测定。
3. 仪器与设备(1)实验室常用设备。(2)回流提取装置。(3)色谱柱:为0.8cm(内径)×30cm的玻璃柱,柱上端为体积30~50mL的贮液池,底端收缩变细,并装有活塞。活塞上约1cm处有一玻璃筛板,筛板孔径为16~30μm。(4)分光光度计。
4. 试剂除特殊说明外,所有试剂均为分析纯,实验用水为蒸馏水。(1)甲醇。(2)氯仿。(3)乙酸甲酯。(4)丙酮:用前重蒸馏。(5)10%丙酮:取50mL丙酮溶解于450mL水中。(6)冰乙酸。(7)冰乙酸-甲醇溶液:取50mL冰乙酸和40mL甲醇混合。 |
|
上一篇:保健食品中总皂苷的分光光度法测定
下一篇:GC法测定富马酸卢帕他定有机溶剂残留量
|