摘要:采用渗漉法、温浸法2种传统方法和(3O2超临界萃取法分别提取山豆根中苦参碱,运用高效液相色谱
法,以苦参碱为标准品,测定各提取物中苦参碱的含量,考察了传统方法与超临界(3O2萃取方法从山豆根中提取生
物碱的工艺的优劣,从而确定从山豆根中提取苦参碱的最佳方法。结果表明,用超临界萃取方法萃取的苦参碱含
量比渗漉法高出0.072%,比温浸法高出0.105% ,可看出,超临界萃取方法萃取的苦参碱的含量要高于传统方法。
关键词:超临界萃取;高效液相色谱法;山豆根;苦参碱
中图分类号:R 284.2 文献标识码:A 文章编号:1671.9905(2008)o4.0017-03
山豆根为豆科植物越南槐的根茎,主产广西,野
生,具有豆腥气,味极苦,具有清热解毒,祛风止痛,
消肿利咽的功效。其药理作用的主要基础物质为各
种生物碱,包括苦参碱、氧化苦参碱、安那吉碱和甲
基金雀花碱。研究发现苦参碱类生物碱在中枢神经
系统,心血管系统,抗病毒,抗炎,免疫及抗肿瘤等方
面有重要的药理活性和应用前途⋯1。
超临界萃取技术(Supercritical Fluid Extraition。
简称SFE)是20世纪60年代兴起的一种新型分离
技术,是利用超临界流体具有特异增加的溶解能力
而发展出来的化工分离新方法【2J。山豆根的主要
成分为生物碱,高效液相色谱法(Ⅷ LC)在生物碱
分析中广泛应用。
本文分别采用∞ 超临界萃取法与传统提取
方法提取山豆根中苦参碱,运用HPLC测定各萃取
物中苦参碱的含量,从而确定从山豆根中萃取苦参
碱的最佳方法。
1 实验材料
1.1 实验器材
9FZ-14粉碎机,GM 32.1型超临界O02萃取实
验装置,电热恒温干燥箱,万分之一电子天平;
DIONEX高效液相色谱仪(包括P680泵,ASI.100
自动进样器,UVD340U检测器,柱温控制系统);渗
漉筒、大烧杯、抽滤瓶、布氏漏斗、容量瓶等。
1.2 药品与试剂
使用的山豆根及实验中使用的试剂均为市售。
95%乙醇(分析纯)、37%的盐酸、苦参碱(Matrine,
收稿日期:2007.09.10
中国药品生物制品检定所提供)、乙腈(色谱纯)、磷
酸二氢钠(分析纯),所有实验用水为纯净水。
2 实验方法
2.1 传统方法从山豆根中提取苦参碱
传统提取生物碱的方法有许多,本实验主要以
稀盐酸为溶媒,采用渗漉法和温浸法从山豆根中提
取生物碱。
2.1.1 渗漉法从山豆根中提取苦参碱
步骤:闷润一封底一装筒一封顶一加液一浸渍
一渗漉
方法:取山豆根药粉(0.042 mm)50 g,置于大
烧杯中,加入适量(约40 mL)O.4%的盐酸水溶液,
拌润均匀,闷润l5~30 min。取脱脂棉一小片,少
量0.4%盐酸水溶液润湿,轻轻垫在渗漉筒底部,铺
平。然后将闷润后的药粉分多次装筒,并注意压匀
压平(压紧些),上盖滤纸,加玻璃珠压稳。打开渗漉
筒下口开关后,加入溶媒(0.4%盐酸)。待有流出液
时关闭开关。将流出液倒回筒内。继续加入溶媒,
当溶媒加到高出药面4~5 cm处,加盖放置24 h。
以5 mL·min-1的流速渗漉。收集到l0倍量的溶液
时,压渣取液合并。循环水真空泵抽滤。在恒温80
℃ 的水浴锅内加热蒸发。浓缩干燥,制成千浸膏,干
膏得率为6.8%。其工艺流程图如图1所示。
2.1.2 温浸法从山豆根中提取苦参碱
取山豆根药材粗粉50 g,加入8倍量的0.4%
的盐酸水溶液。放置30 min后,于60℃的恒温水
浴锅内加热提取4 h。过滤后,再加入6倍量的
Q 霸量■譬隧国 一 Iu
18 化工技术与开发 第37卷
0.4%的盐酸,于60℃的恒温水浴锅内加热提取4
h。合并提取液。加热浓缩,干燥,制成干浸膏,干膏
得率为7.O%。提取工艺如图2所示。
上 三 盐酸
渗漉液 药渣
恒温水浴锅蒸去水
湿浸膏
电热恒 干燥箱中干燥
干浸膏
棉的渗漉筒中
小石子。加入适当溶媒
图1 渗漉法从山豆根中提取苦参碱
山豆根粗粉50 g
8倍量。.4%盐酸静置3。min
浸渍后粗粉
滤液 药渣
锅提取4 h,过滤
盐酸
h,过滤
滤液 药渣
合并滤液
合并后滤液
恒温水浴锅蒸去水
湿浸膏
电热恒温干燥箱中干燥
干浸膏
图2 温浸法从山豆根中提取苦参碱
2.2 超临界o0 萃取山豆根中苦参碱
取山豆根粗粉(0.042 FI'I1TI)50 g,置入萃取罐
中,分别在表1所示的条件下萃取。达到萃取时间
后,打开阀门,收集萃取物。在80℃ 的恒温条件下
水