二乙酰藨草镰刀菌烯醇（4，15-diacetoxyscirpenol，DAS）是藨草镰刀菌（Fusarium scirpi）和木贼镰刀菌（F.equisti）的主要代谢产物。它属于基本结构为四环倍半萜烯（sesquiterpene）的单端孢霉烯族化合物（trichothecenes）。迄今为止，从镰刀菌和其他真菌培养物中分离出近70种的单端孢霉烯族化合物，Ueno将其分成A、B、C、D四类，DAS属A类。DAS是天然存在于谷物和饲料中的单端孢霉烯族化合物之一，与A类的T-2毒素、B类的雪腐镰刀菌烯醇（NIV）和脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）共同成为单端孢霉烯族化合物的主要代表。 

DAS为无色结晶，难溶于水，溶于极性溶剂（如甲醇等）。该物质非常稳定，在烹调过程中不会被破坏。DAS的熔点为162~164℃，分子量为366。由于其结构上的双键（C9，C10），在紫外光下不显荧光。 
DAS毒性较强，大鼠腹腔LD50为0.75mg/kg，猪静注LD50为0.367mg/kg。引起中毒的主要症状为呕吐、四肢轻瘫、排便次数增多、小肠粘膜出血、肠系膜淋巴结和脾脏急性坏死等。DAS引起的中毒症状与T-2毒素相似，但较其严重。 
DAS在谷物和饲料中的污染水平仅美国、德国、意大利、印度做了少量的调查，其含量在0.05~31.5mg/kg。已报导的DAS分析方法有薄层色谱法、气相色谱法、气-质联机、放免分析和酶联免疫吸附测定法。现介绍检测DAS的薄层色谱法、气相色谱法和酶联免疫吸附测定法。 
一、薄层色谱法 
（一）原理 
样品经提取、纯化、薄层分离后，用10％硫酸甲醇溶液喷雾处理，加热115℃，DAS呈灰紫色，在波长365nm紫外灯下呈蓝色荧光，根据其在薄层板显示点的最低检出量来测定含量。 
（二）仪器和试剂 
1. 粉碎机，样筛 
2. 电动振荡器； 
3. 玻璃板：5cm×20cm； 
4. 薄层板涂布器； 
5. 展开槽：25cm×6cm×4cm； 
6. 紫外灯：100~125W，带有波长365nm滤光片； 
7. 微量注射器； 
8. 正己烷，三氯甲烷，丙酮； 
9. 甲醇-1％氯化钠（55+45）； 
10. 硅胶：200目薄层色谱用； 
11. 硫酸； 
12. DAS标准溶液：用甲醇稀释三个浓度，1μg/mL、0.2μg/mL、0.04μg/mL。 
（三）操作方法 
1. DAS的提取：称取粉碎样品50g，加入100mL正已烷和200mL甲醇-1％氯化钠混合液，振荡3min，离心5min（2000r/min）；取甲醇水层60mL，加入等量的正已烷；振荡3min，再次除去干扰物质。取甲醇-水层，加入等量的三氯甲烷，萃取3次；蒸干三氯甲烷。用1mL三氯甲烷溶解残渣，可直接进行薄层色谱分析或进一步纯化。 
2. 纯化：上述粗提液，注入硅胶柱（1cm×20cm）中进行柱层析分离，先用40mL三氯甲烷洗脱，再加8mL三氯甲烷-甲醇（97+3）洗脱，得到的三氯甲烷-甲醇层蒸发至1mL，备做薄层色谱分析。 
3. 薄层色谱分析：称4g硅胶G，加10mL蒸馏水，混匀成糊状后，用涂布器铺成5cm×20cm、0.25mm厚的薄层层析板。待干，120℃活化1h。离层析板底边2cm处，距左边1.5cm处点DAS标准溶液10μL（1μg/mL或0.2μg/mL或0.04μg/mL），距右边1.5cm处点样品溶液10μL。在盛三氯甲烷-丙酮（3+2）的展开槽中展开30min，展开17cm时取出自然风干。用10％硫酸-甲醇溶液喷雾处理，115℃加热10min，含DAS的样点可呈灰紫色，在长波紫外光下呈蓝色荧光，其Rf值为0.68。 
食物中含有0.025mg/kg的DAS，使用此法即可肉眼检出。 
二、气相色谱法 
（一）原理 
样品中DAS毒素经提取纯化、衍生化后，通过具电子捕获检测器的气相色谱仪，根据色谱图的保留时间定性，流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。>基线构成之面积称峰面积。A＝×σ×h＝2.507σh＝1.064 Wh/2h>峰面积定量。 
（二）仪器与试剂 
1. 气相色谱仪：Varian Model 6000。或者具有如下条件：电子捕获检测器（63Ni为放射源），直接毛细管进样器：30mm×0.32mm色谱柱（DB-5），0.25ｕm的填充厚度；最好有自动进样装置； 
2. 电动振荡器； 
3. 250mL的厚壁离心管； 
4. 7-氟丁酰咪唑（HFBI）； 
5. Sep-Pak硅胶柱； 
6. 氰提取柱（cyano extraction column）； 
7. DAS标准毒素； 
8. 乙酸乙酯； 
9. 甲醇； 
10. 硫酸铵； 
11. 二氯甲烷； 
12. 乙腈； 
13. 甲苯； 
14. 正庚烷； 
15. 碳酸钠。 
（三）操作方法 
1. 样品中毒素的提取：取粉碎样品50g，加250mL甲醇-水（1+1），高速混匀5min，离心5min（2000r/min）；取50mL上清液，加入30％硫酸铵水溶液和20g Celit 545，搅拌2min；过滤，用50mL水淋洗；取100mL乙酸乙酯萃取4次，以无水硫酸钠去除混合物中的水、再过滤，用25mL乙酸乙酯淋洗；旋转蒸发器蒸干，用2mL二氯甲烷溶解残渣。 
2. 纯化：2mL粗提液和15mL二氯甲烷转入Sep-Pak硅胶柱中，弃去第一个5mL的二氯甲烷；加15mL甲醇-二氯甲烷（5+95）洗脱，蒸干洗脱液。用2mL氯仿-正已烷（1+1）溶解残渣，过氰提取柱。以2mL氯仿-正已烷（1+1）冲洗管壁，转入柱中；加足够的氯仿-正已烷（1+1）洗脱、至收集液达15mL止。 
3. 衍生化：取3mL上述液体，蒸干；与100μLHFBI充分混匀后，加入1mL甲苯-乙腈（95+5），60℃加热1h；冷却后加入1mL3％碳酸钠溶液，混合2min，静置分层，取100μL有机层，用正庚烷稀释到1mL。 
4. 标准液的制备 
（1）贮备液：1.25mg的DAS溶于10mL甲苯-乙腈（95+5）中； 
（2）工作标准液：2mL标准贮备液加100μLHFBI，完成上述衍生化。取100μL衍生液定容至10mL。最后用正庚烷稀释DAS至浓度为125pg/μL。 
5. 气谱分析 
（1）程序升温：初始柱温75℃，保持2min，然后按三步升温，见表27-1。 
表27-1 程序升温步骤 
 

（2）附加条件：进样器口温度为300℃，检测器温度为350℃，氦载气线速度35cm/s，辅助气（10％甲烷，90％氩气）气体流速40mL/min；纸速1cm/min。
该方法可检出100~1000pg的DAS。